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</div>

<p>Der <b>BCA-Test</b> ist eine biochemische Methode, um <a href="Protein" title="Protein">Proteine</a> unter Verwendung von <a href="Bicinchonins%C3%A4ure" title="Bicinchoninsäure">Bicinchoninsäure</a> (BCA) <a href="Quantit%C3%A4t" title="Quantität">quantitativ</a> zu bestimmen.

</p>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Prinzip">Prinzip</h2></div>

<p>An die <a href="Peptidbindung" title="Peptidbindung">Peptidbindung</a> binden zweiwertige <a href="Kupfer" title="Kupfer">Kupferionen</a> und werden bei alkalischem <a href="PH-Wert" title="PH-Wert">pH-Wert</a> zu einwertigen Kupferionen <a href="Reduktion_(Chemie)" title="Reduktion (Chemie)">reduziert</a>. In Anwesenheit von BCA bilden die Kupferionen mit BCA einen blau-violetten Farbstoffkomplex. Bicinchoninsäure ist im <a href="Alkalische_L%C3%B6sung" title="Alkalische Lösung">alkalischen</a> pH-Wert stabil, wodurch im Gegensatz zum Lowry-Test ein Arbeitsschritt weniger notwendig ist.<sup id="cite_ref-Walker_1-0" class="reference"><a href="#cite_note-Walker-1"><span class="cite-bracket">[</span>1<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Die <a href="Nachweisgrenze" title="Nachweisgrenze">Nachweisgrenze</a> ist vergleichbar mit dem Lowry-Test.<sup id="cite_ref-Walker_1-1" class="reference"><a href="#cite_note-Walker-1"><span class="cite-bracket">[</span>1<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Weiterhin ist der BCA-Test weniger störanfällig gegenüber den <a href="Chaotrop" class="mw-redirect" title="Chaotrop">Chaotropen</a> <a href="Harnstoff" title="Harnstoff">Harnstoff</a> und <a href="Guanidiniumchlorid" class="mw-redirect" title="Guanidiniumchlorid">Guanidiniumchlorid</a>, gegenüber den <a href="Salze" title="Salze">Salzen</a> <a href="Ammoniumsulfat" title="Ammoniumsulfat">Ammoniumsulfat</a> und Cäsiumhydrogencarbonat und gegenüber den <a href="Tenside" class="mw-redirect" title="Tenside">Tensiden</a> <a href="Octoxinol_9" title="Octoxinol 9">Triton X-100</a>, <a href="Natriumlaurylsulfat" title="Natriumlaurylsulfat">SDS</a>, <a href="Brij_35" class="mw-redirect" title="Brij 35">Brij 35</a>, Lubrol, CHAPS, CHAPSO und Octylglucosid.<sup id="cite_ref-Walker_1-2" class="reference"><a href="#cite_note-Walker-1"><span class="cite-bracket">[</span>1<span class="cite-bracket">]</span></a></sup>

</p><p>Die Reagenzlösung besteht aus den Stammlösungen A (10 g/L Natriumbicinchoninat, 20 g/L <a href="Natriumcarbonat" title="Natriumcarbonat">Natriumcarbonat</a>, 1,6 g/L <a href="Natriumtartrat" title="Natriumtartrat">Natriumtartrat</a>, 4 g/L <a href="Natriumhydroxid" title="Natriumhydroxid">Natriumhydroxid</a>, 9,5 g/L <a href="Natriumhydrogencarbonat" title="Natriumhydrogencarbonat">Natriumhydrogencarbonat</a>, auf einen pH-Wert von 11,25 mit Natriumhydroxid eingestellt) und B (40 g/L <a href="Kupfersulfat" title="Kupfersulfat">Kupfersulfat</a>-Pentahydrat) in einem Mischungsverhältnis von 50 zu 1.<sup id="cite_ref-Pingoud_2-0" class="reference"><a href="#cite_note-Pingoud-2"><span class="cite-bracket">[</span>2<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Die grünliche Reagenzlösung wird vor Gebrauch frisch aus den Stammlösungen angesetzt.<sup id="cite_ref-Pingoud_2-1" class="reference"><a href="#cite_note-Pingoud-2"><span class="cite-bracket">[</span>2<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Die Probe wird 1:50 mit der Reagenzlösung verdünnt und 30 Minuten bei 60 °C erhitzt.<sup id="cite_ref-Pingoud_2-2" class="reference"><a href="#cite_note-Pingoud-2"><span class="cite-bracket">[</span>2<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Der entstandene lila Farbstoff wird durch <a href="Photometrie" title="Photometrie">Photometrie</a> bei einer <a href="Wellenl%C3%A4nge" title="Wellenlänge">Wellenlänge</a> von 562 nm quantifiziert.<sup id="cite_ref-Pingoud_2-3" class="reference"><a href="#cite_note-Pingoud-2"><span class="cite-bracket">[</span>2<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Während bei <a href="Raumtemperatur" title="Raumtemperatur">Raumtemperatur</a> vor allem die Aminosäuren <a href="Cystein" title="Cystein">Cystein</a>, <a href="Cystin" title="Cystin">Cystin</a>, <a href="Tryptophan" title="Tryptophan">Tryptophan</a> und <a href="Tyrosin" title="Tyrosin">Tyrosin</a> zweiwertige Kupferionen reduzieren, werden die Kupferionen bei 60 °C auch durch die Peptidbindung reduziert, wodurch das Messergebnis weniger von der Aminosäurezusammensetzung der jeweils gemessenen Proteine abhängt.<sup id="cite_ref-Olsen_3-0" class="reference"><a href="#cite_note-Olsen-3"><span class="cite-bracket">[</span>3<span class="cite-bracket">]</span></a></sup>

</p>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Geschichte">Geschichte</h2></div>

<p>Der BCA-Test wurde 1985 von P. K. Smith und Kollegen veröffentlicht.<sup id="cite_ref-4" class="reference"><a href="#cite_note-4"><span class="cite-bracket">[</span>4<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Er basiert auf dem <a href="Lowry-Test" title="Lowry-Test">Lowry-Test</a> von 1951,<sup id="cite_ref-Lowry_5-0" class="reference"><a href="#cite_note-Lowry-5"><span class="cite-bracket">[</span>5<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> der wiederum auf die <a href="Biuret-Reaktion" class="mw-redirect" title="Biuret-Reaktion">Biuret-Reaktion</a> zur Proteinbestimmung von 1949<sup id="cite_ref-6" class="reference"><a href="#cite_note-6"><span class="cite-bracket">[</span>6<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> und das <a href="Folin-Ciocalteu-Reagenz" title="Folin-Ciocalteu-Reagenz">Folin-Ciocalteu-Reagenz</a> von 1927 zurückgreift.<sup id="cite_ref-7" class="reference"><a href="#cite_note-7"><span class="cite-bracket">[</span>7<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> BCA ersetzt beim BCA-Test das Folin-Ciocalteu-Reagenz im Lowry-Test.<sup id="cite_ref-Olsen_3-1" class="reference"><a href="#cite_note-Olsen-3"><span class="cite-bracket">[</span>3<span class="cite-bracket">]</span></a></sup>

</p>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Literatur">Literatur</h2></div>

<ul><li>C. M. Stoscheck: <i>Quantitation of protein.</i> In: <i>Methods in enzymology.</i> Band 182, 1990, S. 50–68, <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2314256?dopt=Abstract">PMID 2314256</a>.</li></ul>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Einzelnachweise">Einzelnachweise</h2></div>

<li id="cite_note-Walker-1"><span class="mw-cite-backlink">↑ <sup><a href="#cite_ref-Walker_1-0">a</a></sup> <sup><a href="#cite_ref-Walker_1-1">b</a></sup> <sup><a href="#cite_ref-Walker_1-2">c</a></sup></span> <span class="reference-text">John M. Walker: <i>The Protein Protocols Handbook.</i> Springer Science & Business Media, 2008, ISBN 978-1-603-27259-9, S. 11.</span>

</li>

<li id="cite_note-Pingoud-2"><span class="mw-cite-backlink">↑ <sup><a href="#cite_ref-Pingoud_2-0">a</a></sup> <sup><a href="#cite_ref-Pingoud_2-1">b</a></sup> <sup><a href="#cite_ref-Pingoud_2-2">c</a></sup> <sup><a href="#cite_ref-Pingoud_2-3">d</a></sup></span> <span class="reference-text"><a href="Alfred_Pingoud" title="Alfred Pingoud">Alfred Pingoud</a>: <i>Arbeitsmethoden der Biochemie.</i> Walter de Gruyter, 1997, ISBN 978-3-110-16513-5, S. 152.</span>

</li>

<li id="cite_note-Olsen-3"><span class="mw-cite-backlink">↑ <sup><a href="#cite_ref-Olsen_3-0">a</a></sup> <sup><a href="#cite_ref-Olsen_3-1">b</a></sup></span> <span class="reference-text">Olsen BJ, Markwell J: <cite style="font-style:italic">Assays for the Determination of Protein Concentration</cite>. In: <cite style="font-style:italic">Current Protocols in Protein Science</cite>. 2007, <span style="white-space:nowrap">S.<span style="display:inline-block;width:.2em"> </span>14–17</span> (<a rel="nofollow" class="external text" href="https://media.wiley.com/CurrentProtocols/0471111848/0471111848-sampleUnit.pdf">wiley.com</a> [PDF]).<span class="Z3988" title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Abook&rfr_id=info:sid/de.wikipedia.org:BCA-Test&rft.atitle=Assays+for+the+Determination+of+Protein+Concentration&rft.au=Olsen+BJ%2C+Markwell+J&rft.btitle=Current+Protocols+in+Protein+Science&rft.date=2007&rft.genre=book&rft.pages=14-17" style="display:none"> </span></span>

</li>

<li id="cite_note-4"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-4">↑</a></span> <span class="reference-text">P. K. Smith, R. I. Krohn, G. T. Hermanson, A. K. Mallia, F. H. Gartner, M. D. Provenzano, E. K. Fujimoto, N. M. Goeke, B. J. Olson, D. C. Klenk: <i>Measurement of protein using bicinchoninic acid.</i> In: <i>Analytical biochemistry.</i> Band 150, Nummer 1, Oktober 1985, S. 76–85, <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3843705?dopt=Abstract">PMID 3843705</a>. <a href="Digital_Object_Identifier" title="Digital Object Identifier">doi</a>:<span class="uri-handle" style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1016/0003-2697%2885%2990442-7">10.1016/0003-2697(85)90442-7</a></span>.</span>

</li>

<li id="cite_note-Lowry-5"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-Lowry_5-0">↑</a></span> <span class="reference-text"><a href="Oliver_Lowry" title="Oliver Lowry">Oliver H. Lowry</a> <i>et al.</i>: <i>Protein measurement with the Folin phenol reagent.</i> In: <i><a href="J._Biol._Chem." class="mw-redirect" title="J. Biol. Chem.">J. Biol. Chem.</a></i> Band 193, Nr. 1, 1951, S. 265–275. <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14907713?dopt=Abstract">PMID 14907713</a>. <style data-mw-deduplicate="TemplateStyles:r261891140">

/* start https://de.wikipedia.org/ */

.mw-parser-output .webarchiv-memento a{color:inherit}

/* end https://de.wikipedia.org/ */

</style><a rel="nofollow" class="external text" href="https://web.archive.org/web/20070929111023/http://www.jbc.org/cgi/reprint/193/1/265.pdf">PDF</a> (<span class="webarchiv-memento"><a href="Webarchivierung#Begrifflichkeiten" title="Webarchivierung">Memento</a></span> vom 29. September 2007 im <i><a href="Internet_Archive" title="Internet Archive">Internet Archive</a></i>).</span>

</li>

<li id="cite_note-6"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-6">↑</a></span> <span class="reference-text">A. G. Gornall, S. J. Bardawill, M. M. David: <i>Determination of serum proteins by means of the biuret reaction.</i> In: <i>J Biol Chem.</i> Band 177(2), 1949, S. 751–766. <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18110453?dopt=Abstract">PMID 18110453</a>.</span>

</li>

<li id="cite_note-7"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-7">↑</a></span> <span class="reference-text">Folin, O., und Ciocalteu, V.: <cite style="font-style:italic">On tyrosine and tryptophane determinations in proteins</cite>. In: <cite style="font-style:italic">Journal of Biological Chemistry</cite>. 73. Jahrgang, 1927, <span style="white-space:nowrap">S.<span style="display:inline-block;width:.2em"> </span>627</span> (<a rel="nofollow" class="external text" href="http://www.jbc.org/content/73/2/627.full.pdf">jbc.org</a> [PDF]).<span class="Z3988" title="ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info%3Aofi%2Ffmt%3Akev%3Amtx%3Abook&rfr_id=info:sid/de.wikipedia.org:BCA-Test&rft.atitle=On+tyrosine+and+tryptophane+determinations+in+proteins&rft.au=Folin%2C+O.%2C+und+Ciocalteu%2C+...&rft.btitle=Journal+of+Biological+Chemistry&rft.date=1927&rft.genre=book&rft.pages=627&rft.volume=73.+Jahrgang" style="display:none"> </span></span>

</li>

</ol></div><div><div class="zim-footer">

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